真菌培養(yǎng)的方法與直接鏡檢法相比較而言，更能對大部分真菌感染的灰指甲作出準確的鑒定，也是診斷灰指甲的一個很重要的手段。下面我們就從培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)時間、菌種鑒定三方面來了解一下灰指甲的真菌培養(yǎng)法。

1、培養(yǎng)基的選擇

通常培養(yǎng)真菌會同時選用兩種培養(yǎng)基，如果單用一種培養(yǎng)基，則容易忽略其它種類的真菌診斷。常見的兩種培養(yǎng)基，一種為沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中加抗菌劑，常為氯霉素和放線菌酮；另一種是沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中僅加氯霉素，不加放線菌酮。

2、培養(yǎng)時間

各種真菌的生長速度不同，所以報告的時間也不同。一般皮膚癬菌生長較緩慢，在26℃-28℃的環(huán)境下需要培養(yǎng)2-4周才能發(fā)報告，但是，皮膚癬菌含蓋的菌種較多也需要區(qū)別對待；酵母菌生長較快，通常2-3就可以發(fā)報告，如果為陰性則需要觀察1周；霉菌生長也比較快，一般2-4天就可以發(fā)報告。

3、菌種鑒定

（1）絲狀真菌：包括皮膚癬菌和霉菌，根據(jù)菌落形成所需要的時間，在不同條件下生長的情況，菌落表面及背面的形態(tài)、色素，培養(yǎng)基中有無色素，培養(yǎng)物用乳酚棉藍染色后鏡檢找特征性標志結構。（2）酵母菌：分為形態(tài)學鑒定及生化試驗。形態(tài)學鑒定主要觀察有無假菌絲產生，如有則為念珠菌屬，如無則為念珠菌以外的酵母菌；生化試驗最為常用的是API系統(tǒng)，用此法鑒定準確，但價格較貴。